醫(yī)療器械的細(xì)菌內(nèi)毒素檢驗(yàn)

細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法是利用鱟試劑來檢測或量化由革蘭陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌內(nèi)毒素，以判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法。

一、細(xì)菌內(nèi)毒素簡介：

細(xì)菌內(nèi)毒素是革蘭陰性菌細(xì)胞壁外膜中的一種組分，主要成分是脂多糖，后者由細(xì)菌細(xì)胞壁合成后轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞表面，細(xì)菌死亡或自溶后會從細(xì)菌細(xì)胞結(jié)構(gòu)中釋放出來，能導(dǎo)致人體發(fā)熱、休克甚至死亡。革蘭陰性菌的典型菌群有大腸桿菌、傷寒桿菌、淋球菌、腦膜炎球菌、志賀菌、結(jié)核桿菌，痢疾桿菌等。這類菌群的致熱性除全菌體和胞壁中所含的肽聚糖外，突出的是其胞壁中所含的內(nèi)毒素。所以，內(nèi)毒素是革蘭陰性菌的主要毒力因子。

二、細(xì)菌內(nèi)毒素檢測方法介紹：

目前細(xì)菌內(nèi)毒素檢測包括兩種方法，即凝膠法和光度測定法，后者包括濁度法和顯色法。

1.濁度法

此方法是通過利用鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)發(fā)生濁度變化測定內(nèi)毒素的含量?；诖嗽囼?yàn)原理，可以分為終點(diǎn)濁度法和動態(tài)濁度法。終點(diǎn)濁度法是基于內(nèi)毒素濃度與反應(yīng)混合物在培養(yǎng)一段時(shí)間后的濁度（吸光度或透光率）的量化關(guān)系。動態(tài)濁度法是測定反應(yīng)混合物達(dá)到預(yù)定吸光度或透光率需要的時(shí)間（初動時(shí)間）或濁度增加的速度的方法。進(jìn)行此實(shí)驗(yàn)時(shí)需要在鱟試劑生產(chǎn)商建議的培養(yǎng)溫度下進(jìn)行（通常是37 ±1℃）。

2.顯色法

此方法是一種通過測定鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)產(chǎn)生的縮氨酸釋放出的顯色基團(tuán)的來進(jìn)行試驗(yàn)的方法。 基于以上特殊的試驗(yàn)原理，此方法可以分為終點(diǎn)顯色法與動態(tài)顯色法。終點(diǎn)顯色法是基于內(nèi)毒素的濃度與孵育結(jié)束時(shí)所釋放的顯色基團(tuán)的量化關(guān)系的一種試驗(yàn)方法。動態(tài)顯色法是測定反應(yīng)混合物達(dá)到預(yù)定的吸收度所需要的時(shí)間或其顏色增長的速度。進(jìn)行此實(shí)驗(yàn)時(shí)需要在鱟試劑生產(chǎn)商建議的培養(yǎng)溫度下進(jìn)行（通常是37±1℃）。

三、微生物學(xué)檢測標(biāo)準(zhǔn)

GB/T 14233.2-2005 醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法第2部分：生物學(xué)試驗(yàn)方法

2015年版《中國藥典》1143 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法